ABSTRACT
ABSTRACT Various extracts obtained from the red alga Plocamium brasiliense (Greville Howe & Taylor), including a fraction containing crude 5-chloro-1-(E)-chlorovinyl-2,4-dibromo-1,5-dimethylcyclohexane (1) and another containing a mixture of halogenated monoterpenes (F), as well as atomaric acid meroditerpene (2) isolated from brown alga Stypopodium zonale (J. V. Lamouroux) Papenfuss, were evaluated for their activity against Trypanosoma cruzi. The cytotoxic and trypanosomicidal effects of these extracts were evaluated in Vero cells and clinically relevant forms of T. cruzi (amastigotes and trypomastigotes). All extracts from P. brasiliense presented low cytotoxicity and moderate trypanosomicidal effects, except for the hydroalcoholic extract. The crude 1 and F fractions had enhanced trypanocidal activity but showed low selectivity. Moreover, atomaric acid (2) was identified as a hit, demonstrating a potent trypanocidal effect reaching an IC50 <10 µM against two different DTU (Yand high selectivity index (<10). These results identify marine natural products as promising candidates against Chagas disease.
ABSTRACT
Componentes de matriz extracelular têm importante papel na patologia da doença de Chagas, podendo participar do processo de invasão do Trypanosoma cruzi ou acumular-se progressivamente no tecido cardíaco, levando à fibrose que ocorre em concomitância com a miocardite chagásica. Citocinas secretadas durante a inflamação podem funcionar como mediadoras do processo fibrótico. No entanto, os mecanismos reguladores da fibrose chagásica ainda precisam ser bem esclarecidos. Ensaios de interação T. cruzi - cardiomiócito in vitro revelaram a participação da seqüência RGD de fibronectina (FN) no processo de invasão. A análise histopatológica do miocárdio de camundongos Suíços infectados pelo T. cruzi, cepa Y, revelou a presença de intensos infiltrados inflamatórios na fase aguda da infecção experimental, enquanto animais infectados com T. cruzi, clone Dm28c, não apresentaram miocardite. Um aumento nos depósitos de FN, laminina (LM) e colágeno IV detectados por imunofluorescência indireta foi revelado apenas no miocárdio de animais infectados com T. cruzi cepa Y, mas não com Dm28c. Por outro lado, a análise da interação T. cruzi-cardiomiócito in vitro demonstrou redução na expressão de FN em cardiomiócitos altamente infectados, enquanto a LM apresentou somente alterações em sua distribuição. O tratamento das culturas de cardiomiócitos com TGF-beta e TNF-alfa provocou aumento generalizado na expressão de matriz de FN, mas não alterou a expressão de LM. A análise das imagens de culturas de cardiomiócitos infectados pelo T. cruzi (72h) com o programa KS400 revelou baixa superposição de FN com células altamente infectadas, mesmo após o tratamento com citocinas. Este evento parece estar relacionado com a quebra de miofibrilas decorrente da infecção, uma vez que o tratamento de cardiomiócitos com citocalasina D, droga que despolimeriza filamentos de actina, resultou em uma desestruturação similar das fibrilas de FN independente da presença de citocinas. A adição de...